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维生素B1的前处理,精华都在这里了!
发布时间:2021-11-25   点击次数:41次
  在大家买的食品中都会看到一个营养标签,有时会在标签中看到维生素B1的含量,接下来就让大家了解一下维生素检测前处理的步骤吧。
 
  试剂配制
 
  20g/l的铁qin化钾溶液:称取1g铁qin化钾,先用少量的水溶解后再定容至50ml。
 
  100g/l的氢氧化钠溶液:称取10g氢氧化钠,加水溶解后定容至100ml。
 
  碱性铁qin化钾:将上述的5ml铁qin化钾和100ml的氢氧化钠混合均匀后备用(现用现配)。
 
  0.1mol/l的盐酸溶液:准确移取8.5ml浓盐酸,加水稀释至1000ml。
 
  2.0mol/l乙酸钠溶液:称取27.1g乙酸钠,用水溶解后定容至100ml
 
  混合酶溶液:称取1.76g木瓜蛋白酶和1.27g淀粉酶,加水定容至50ml,涡旋混匀后冷藏密封保存,临用时现取。
 
  样品提取
 
  1.称取5g(精确至0.01g)固体试样或10g液体试样于带塞子的锥形瓶中,加60ml0.1mol/l的盐酸溶液,充分摇匀后塞上塞子,高压灭菌锅中121℃,30min.冷却至常温后摇匀。
 
  2.用2.0mol/l的乙酸钠溶液调节pH至4.0左右,准确移取2.0ml混合酶溶液,摇匀后放入培养箱37℃培养16h。
 
  3.将溶液用漏斗全部移至100ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀后过滤。
 
  试液制备
 
  1.准确移取滤液2.0ml至10ml的离心管中,加入1.0ml的碱性铁qin化钾溶液,涡旋混匀后,加入2.0ml的正丁醇,涡旋1.5min后离心五分钟。
 
  2.汲取上层经0.45μm有机微孔滤膜过滤,取滤液2ml放入棕色进样瓶中待测。
 
  其他
 
  到这一步维生素B1的前处理就完成了,特别要注意以下几点:
 
  1.混合蛋白酶和碱性铁qin化钾要现用现配,曾经小编这里就出现过蛋白酶密封放冰箱三天就会变臭,可能是因为酶活性高,容易变质。
 
  2.一定不要忘记加1.0ml碱性铁qin化钾,否则不出峰。
 
  3.离心之前一定要涡旋1.5min,或者手动摇匀1.5min,使维生素B1充分提取出来。
 
  4.拔针头时注意安全,使用完后将针头盖好,保护他人安全。

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