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如何正确对ELISA试剂盒进行提纯?
发布时间:2021-11-18   点击次数:19次
  ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),已知浓度的规范品、不知道浓度的样品参加微孔酶标板内进行检查。先将生物素符号的抗体一起温育。洗刷后,参加亲和素符号过的HRP。再通过温育和洗刷,去掉未的酶物,然后参加底物A、B,和酶物一起效果。产生色彩。ELISA试剂盒色彩的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
 
  ELISA试剂盒的提纯方法:
 
  1、蒸馏:对于易挥发的试剂,如常用的无机酸,有机溶剂等是比较常用的提纯方法,根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。
 
  2、升华:对于某些易升华的试剂,如碘、萘等,此法比较简便。
 
  3、重结晶:适用于大多数固体试剂的提纯,其关键是选择好合适的溶剂。
 
  4、溶剂萃取:无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中,均可达到提纯的目的。
 
  5、离子交换色谱分离。
 
  ELISA试剂盒的使用注意事项:
 
  一、ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
  二、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果
 
  三、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间需控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
  四、请每次测定的同时做标准曲线,需做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
 
  五、严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
 
  六、本试剂不同批号组分不得混用。

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