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ELISA试剂盒的检测经验分享,新手值得借鉴
发布时间:2021-04-27   点击次数:154次
  ELISA试剂盒具有敏感性高,特异性强,快速等特点,目前广泛应用于农兽药、真菌毒素残留检测。但该方法从加样、洗板、显色到读数步骤繁多,其中任何一步控制不好都可能影响检测结果的准确性。因此,在实际测定操作中一定要注意以下几点。
 
  一、温度
 
  1.试剂盒回温
 
  大多数ELISA检测试剂盒为冷藏(2℃-8℃)保存。从冰箱拿出来后,先不要急于打开试剂盒,要等试剂盒的温度平衡至室温且试剂盒盒表面无冷凝水。检测所用的试剂需充分混匀且彻底溶解后再用。
 
  Tips:提前1~2小时取出试剂盒,放在室温中;或在预设25℃恒温培养箱中平衡30分钟~60分钟。
 
  2.环境温度的控制
 
  实验室可采用以下措施控制温度:
 
  1)实验室应配备温湿度表,且确保定期计量。
 
  2)根据天气情况设定实验室空调制冷或加温功能,待室温稳定且无干扰的条件下再开始检测流程。
 
  3)选用带温控装置的孵育仪器,如恒温孵育器、恒温培养箱、多功能酶标仪等。注意要提前开启预热。
 
  Tips:大多数试剂盒加样后反应时间较短,环境温度对检测结果会有很大影响,所以控制好环境温度是保证试剂盒检测结果有效的重要因素。
 
  3.孵育
 
  孵育时要保证温度均匀,防止挥发变干。孵育时使用封板膜,并置于暗处孵育。多块板一起实验时,要平放各板,不要叠放,避免温度扩散的不均匀性或边缘效应。
 
  二、剩余试剂的妥善保存
 
  试剂盒恢复至室温后,取出要使用的酶标板孔,未使用的酶标板孔应及时放回铝箔袋,加入干燥剂,封紧封口,2℃-8℃冷藏保存。
 
  Tips:切忌将未完全平衡至室温的酶标板放回铝箔袋,因为此时由于温度差,酶标板上会有水汽,不利于稳定保存。
 
  三、加样
 
  1.加样要快速准确,时间宜控制在15分钟内。
 
  2.如样品量较大,可分次完成实验,或将测样液置于预混微孔板中使用多通道移液器快速移取。
 
  3.汲取同一试剂,可将试剂倒入V型加样槽中,使用多通道移液器快速移取。

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